Анализ крови агрегация тромбоцитов с адреналином

Опубликовано автором

Агрегация тромбоцитов с АДФ

Агрегация тромбоцитов с АДФ — диагностика оценки активации реакции слипания (агрегации) тромбоцитов с использованием специального индуктора агрегации — аденозиндифосфата (АДФ). АДФ способствуют склеиванию тромбоцитов (агрегации). Тест агрегация тромбоцитов с АДФ позволяет провести оценку функции тромбоцитов посредством изучения их агрегации под воздействием индуктора агрегации. Анализ помогает диагностировать заболевания свертывающей системы крови.

Тромбоциты — это клетки крови, которые ответственны за свертывание. Состояния, связанные со снижением агрегации (слипания) тромбоцитов, включают наследственные и приобретенные нарушения функции клеток. Анализ на агрегацию тромбоцитов проводят для выявления и диагностики дисфункции тромбоцитов у пациентов с чрезмерными кровотечениями.

Когда повреждаются сосуды тромбоциты скапливаются в месте повреждения, активируются и прилипают друг к другу, образуя тромбоцитарный тромб, происходит образование первичной гемостатической пробки, которая способствует остановке кровотечения и заживлению раны. При активации тромбоцитов возникает реакция, завершающаяся активацией фосфолипазы. В результате мембрана клетки изменяет свойства и может вступать в контакт с соседними клетками. Вследствие этого тромбоциты могут агрегировать друг с другом и образовывать тромбоцитарный тромб.

Агрегация — свойство тромбоцитов соединятся друг с другом. Адгезия — способность тромбоцитов прилипать к поврежденной интиме сосуда. Таким образом, адгезия и агрегация — процессы необходимые для формирования так называемой «пробки», чтобы закрыть место поражения в сосудистой стенке. Усиленная активация тромбоцитов при патологии может приводить к избыточному тромбообразованию и, наоборот, при замедлении агрегации могут возникать геморрагии (кровотечения).

Активация тромбоцитов — необходимый элемент для нормального гемостаза. В нормальных условиях циркулирующие тромбоциты не взаимодействуют с внутренней поверхностью и эндотелиальными клетками сосудов. Но при повреждении стенки сосудов в просвет сосуда выходит коллаген и тромбоциты при участии фактора Виллебранда прилипают (адгезия) к поврежденному участку сосуда.
Повышенная агрегация тромбоцитов сопровождается ишемической болезнью сердца и развитием инфаркта миокарда.

  • диагностическая оценка чрезмерного кровотечения или повышенной кровоточивости;
  • оценка функции тромбоцитов у беременных;
  • мониторинг функции тромбоцитов перед сложными хирургическими операциями.

Подготовка
Специальная подготовка не требуется. Взятие крови рекомендуется проводить не ранее, чем через 6–8 часов после последнего приема пищи. Накануне исследования следует исключить приём алкоголя и курение, физические и эмоциональные нагрузки.

Если пациент принимает лекарственные препараты, следует проконсультироваться с врачом по поводу целесообразности проведения исследования на фоне приёма препаратов или возможности его отмены перед исследованием, длительность отмены определяется периодом выведения препарата из крови.

Интерпретация результатов
Интерпретация теста основывается на анализе характера агрегации (одно- или двухволновая, полная или неполная, обратимая или необратимая), а также некоторых других показателей.

Источник



Агрегация тромбоцитов

Для оценки функции тромбоцитов в Лаборатории ЦИР проводится анализ на индуцированную агрегацию тромбоцитов. Это анализ высокого качества, выполняется на автоматическом агрегометре. Так как этот анализ резко меняется при приеме препаратов, влияющих на свертывание крови (антиагреганты, например, аспирин, тромбо-асс, антикоагулянты, например, гепарин), желательно сдавать его до начала приема этих лекарств. По каждой агрегатограмме врач-лаборант выдает заключение.

Анализ на агрегацию тромбоцитов рекомендуется в следующих случаях: при image003.jpgневынашивании беременности, неудачных попытках ЭКО, тяжелых осложнениях беременности в анамнезе, бесплодии неясного генеза, а также при повышенной кровоточивости: легкое образование синяков, меноррагии, носовые кровотечения.

В кривой агрегации оцениваются амплитуда агрегации, форма кривой, наличие одной или двух волн, а также наличие дезагрегации.

Читайте также:  Какой срок анализов крови перед операцией

На приведенном образце обозначены: 1- обнуление прибора, 2 — до добавления индуктора, 3 — пик, связанный с разведением пробы индуктором, 4 — начало отсчета, первая волна, 5 — вторая волна, 6 — дезагрегация.

Важная информация: сочетание приема пищевых продуктов, фитопрепаратов и пищевых добавок, содержащих компоненты из данного списка, с приемом антиагрегантов (тромбоАСС) и антикоагулянтов (гепарин) является опасной по риску кровотечения комбинацией (категория D по классификации FDA). Риск кровотечения в большинстве случаев превышает потенциальную пользу.

  • Агрегация с АДФ
  • Агрегация с арахидоновой кислотой
  • Агрегация с адреналином (эпинефрином)
  • Агрегация с ристоцетином.
    Три первых индуктора позволяют оценить функцию тромбоцитов разных сторон, они дополняют друг друга. Агрегация с ристоцетином позволяет заподозрить опасное по кровотечениям состояние – болезнь Виллебранда (дефицит фактора фон Виллебранда). При планировании беременности этот анализ важен для исключения риска кровотечения в родах.

Агрегация с АДФ (синяя линия) и арахидоновой кислотой. Агрегационный ответ резко снижен. Дезагрегация практически отсутствует.

Агрегация с АДФ.
Агрегационный ответ снижен. Дезагрегация практически отсутствует.

Источник

Агрегация тромбоцитов с адреналином

Тромбоциты – клеточные элементы крови, основной функцией которых является участие в процессе свертывания крови и остановке кровотечения. Основные эффекты тромбоцитов – адгезия (прилипание к поверхности) и агрегация («слипание» между собой), а также, высвобождение ряда биологически активных веществ позволяет формировать сгусток и эффективно останавливать кровотечение.

Так происходит в физиологических (нормальных) условиях. При патологии, тромбоциты также могут активироваться, например, при встрече с атеросклеротическими наложениями на сосудистой стенке, либо, при отложении иммунных комплексов в интиме сосудов. Таким образом, активировать тромбоциты может любое повреждение сосудистой стенки, не обязательно травматического происхождения. Помимо внешних стимулов, наличие или отсутствие агрегации обуславливают некоторые генетические причины, связанные с пониженной или, наоборот, повышенной активностью тромбоцитов.

Исследование агрегации тромбоцитов проводится с помощью специального прибора агрегометра, который регистрирует все необходимые данные и выдает результат в виде специального графика – агрегатограммы. В зависимости от цели исследования используются различные реактивы. Определение агрегации тромбоцитов с адреналином основывается на связи данного вещества с а2-адренорецепторами тромбоцитов, тем самым, активируя их агрегацию. Результат интерпретируется врачом, на основании данных агрегатограммы, клинической картины заболевания и других дополнительных тестов.

Определение агрегации тромбоцитов с адреналином обычно не используется как самостоятельное исследование. Для получения более точных результатов необходимо проведение исследования агрегации тромбоцитов с адреналином, коллагеном, АДФ и ристоцетином. Только на основании всех данных врач сможет точно определить причину нарушения свертывающей системы крови и подобрать соответствующее лечение.

За 4 часа до исследования агрегации тромбоцитов с адреналином необходимо воздержаться от приема пищи, в особенности, содержащей большое количество жиров. За 2 часа до обследования – исключить курение, в течение 15-20 минут необходимо находиться в состоянии физического и психоэмоционального покоя.

  • Дифференциальная диагностика нарушений свертывающей системы крови, при наличии клинической картины и подтверждающих лабораторных данных (наличие кровоподтеков различного масштаба, длительных, не останавливающихся кровотечений, удлинение времени свертывания и длительности кровотечения по данным анализа крови, изменения в данных коагулограммы)
  • Обследование пациенток во время беременности, в особенности при наличии угрозы выкидыша, при неудачных попытках ЭКО, привычном невынашивании беременности и т.д.
  • Мониторинг состояния пациентов, находящихся на антиагрегантной терапии

Референсные значения для агрегации тромбоцитов с адреналином – 50-90%

Интерпретацию результатов проводит лечащий врач с учетом анамнеза, клинической ситуации, недавнего и текущего приема лекарственных препаратов и результатов других исследований.

Читайте также:  Цена на правовой анализ документов

Таблица. Изменения агрегации тромбоцитов под действием применяемых индукторов при некоторых вариантах патологии гемостаза

Вариант патологии гемостаза Агрегация тромбоцитов под действием индукторов
АДФ Адреналин Коллаген
Тромбоцитопатия N / ↓↓ N / ↓↓ N / ↓↓
Влияние ацетилсалициловой кислоты или других НПВП N / ↓↓ ↓↓ N
Влияние клопидогрела и тиклопидина ↓↓↓ N / ↓ N / ↓
Нарушение пула хранения гранул N / ↓↓ ↓↓ N / ↓
Дефект рецептора коллагена N N ↓↓↓ / 0
Дефекты активности тромбоксан-синтетазы ↓↓ ↓↓ ↓
Аномалия фосфолипазы А2 ↓↓ ↓↓ ↓
ТромбастенияГланцмана
Афибриногенемия ↓↓ / 0 ↓↓ / 0 ↓↓ / 0
  • N – нормальная агрегация
  • ↓ – умеренное снижение
  • ↓↓ – снижение
  • ↓↓↓ – выраженное снижение
  • 0 – отсутствие агрегации

Состояния, ассоциированные с повышенной реактивностью тромбоцитов: ишемическая болезнь сердца, цереброваскулярные расстройства, атеросклероз периферических артерий, острый коронарный синдром, стентирование коронарных артерий, сахарный диабет, антифосфолипидный синдром, миелопролиферативные расстройства, гепарин-индуцированная тромбоцитопения. Повышенная реактивность может быть обнаружена и у некоторых здоровых людей (чаще отмечается у женщин, есть связь с уровнем фибриногена, возможны генетические особенности).

Таблица препаратов, влияющих на функции тромбоцитов (цит. по: Guidelines for the Laboratory Investigation of Heritable Disorders of Platelet Function. British Committee for Standards in Haematology. 2011).

Источник

Исследование агрегационной способности тромбоцитов

Повышение агрегации – маркер гиперагреационного синдрома и тромбофилий. Наиболее часто используются турбидиметрический метод Борна, основанный на регистрации изменений светопропускания обогащенной тромбоцитами плазмы и метод исследования агрегации тромбоцитов, основанный на анализе флуктуаций светопропускания, вызванных случайным изменением числа частиц в оптическом канале.

Материал для исследования. Цитратная богатая тромбоцитами плазма

Метод исследования определяется порядком работы на том или ином типе агрегометра.

В качестве индукторов наиболее часто используют растворы АДФ, ристоцетина, коллагена, адреналина, арахидоновой кислоты. Также могут использоваться растворы тромбина, серотонина и др.

Агрегация тромбоцитов с АДФ

Воздействие малых доз АДФ (обычно 1*10 -7 моль) приводит к формированию двойной волны агрегации. Первая фаза (первичная волна) зависит от добавленного экзогенного АДФ, а вторая фаза (вторичная волна агрегации) возникает за счет реакции высвобождения собственных агонистов, содержащихся в гранулах тромбоцитов. Большие дозы АДФ (обычно 1*10 -5 моль) приводят к слиянию первой и второй волн агрегации.

При анализе агрегатограмм обращают внимание на общий характер агрегации (одноволновая, двухволновая; полная, неполная; обратимая, необратимая) и скорость агрегации. Появление двухволновой агрегации при стимуляции АДФ в концентрациях, вызывающих в норме обратимую агрегацию (обычно 1-5 мкмоль), указывает на повышение чувствительности тромбоцитов, а развитие одноволновой неполной (а часто и обратимой) агрегации при стимуляции АДФ в концентрациях 10 мкмоль и больше – на нарушение реакции высвобождения тромбоцитов.

Агрегация тромбоцитов с ристоцетином

Определение агрегации тромбоцитов с ристоцетином в плазме применяют для количественной оценки фактора Виллебранда. В основе метода лежит способность ристоцетина стимулировать in vitro взаимодействие фактора Виллебранда с тромбоцитарным гликопротеидом Ib. В большинстве случаев болезни Виллебранда отмечается нарушение ристоцетин-агрегации при нормальном ответе на воздействие АДФ, коллагена и адреналина. Нарушение ристоцетин-агрегации выявляют и при болезни Бернара-Сулье. Для дифференциации применяют тест с добавлением нормальной плазмы: при болезни Виллебранда после добавления нормальной плазмы ристоцетин-агрегация нормализуется, в то время как при синдроме Бернара-Сулье этого не происходит. Индуцированная ристоцетином агглютинация тромбоцитов снижена при большинстве случаев болезни Виллебранда, кроме типа IIВ.

Читайте также:  Анализ движения и качественного состава работников

Агрегация тромбоцитов с коллагеном

Агрегация тромбоцитов с коллагеном имеет достаточно выраженную латентную фазу, во время которой происходит активация фосфолипазы С. В зависимости от концентрации используемого реагента продолжительность этой фазы может составлять 5-7 минут. После завершения этого периода в тромбоцитах происходят процессы, приводящие к образованию вторичных посредников, вследствие чего развивается секреция тромбоцитарных гранул и синтез тромбоксана А2, что сопровождается резким усилением межтромбоцитарного взаимодействия.

В лабораторно-клинической практике коллаген чаще всего используют в конечной концентрации 50 мкг/мл, однако коллагены разных фирм могут обладать различной активностью, что необходимо учитывать при их применении.

Агрегация тромбоцитов с адреналином

Адреналин при контакте с тромбоцитами взаимодействует с α2-адренорецепторами, что вызывает ингибирование аденилатциклазы. Не исключено, что механизм, лежащий в основе реализации эффекта адреналина и развития первой волны агрегации, не зависит от образования тромбоксана А2, реакции высвобождения или синтеза фактора агрегации тромбоцитов, а связан со способностью адреналина прямо изменять проницаемость клеточной мембраны для ионов кальция. Вторая волна агрегация возникает как результат реакции высвобождения и продукции тромбоксана А2.

Агрегация тромбоцитов с арахидоновой кислотой

Арахидоновая кислота – природный агонист агрегации, причем ее действие опосредовано эффектами простагландинов G2 и H2, тромбоксана А2, и включает активацию как фосфолипазы C с последующим образованием вторичных посредников, мобилизацией внутриклеточного кальция и расширением процесса активации клеток, так и фосфолипазы А2, что непосредственно приводит к освобождению эндогенной арахидоновой кислоты. Агрегация тромбоцитов с арахидоновой кислотой происходит достаточно быстро, поэтому кривая, характеризующая этот процесс, чаще носит одноволновый характер.

Для индукции агрегации кровяных пластинок арахидоновую кислоту используют в концентрациях 10 -3 -10 -4 моль. При работе с арахидоновой кислотой следует учитывать, что на воздухе это вещество очень быстро окисляется.

Пробу на агрегацию с арахидоновой кислотой рекомендуют проводить в случаях использования лекарственных средств, влияющих на реакцию агрегации (например, ацетилсалициловая кислота, пенициллин, индометацин, делагил, диуретики), что нужно учитывать при оценке результатов исследований.

Источник

Анализ крови агрегация тромбоцитов с адреналином

Если вам необходимо исследовать такой параметр, как агрегация тромбоцитов, где сдать анализ, подскажет лечащий врач. Хорошим выбором станет центр «Санмедэксперт» на м. «Бауманская» в ЦАО Москвы: здесь вы получите результаты через один рабочий день. Профессионализм лаборантов – залог корректно проведенного исследования.

Особенности и показания

При осложненной беременности, перед оперативным вмешательством в рамках расширенного исследования картины крови может потребоваться такой тест как агрегация тромбоцитов, сдать анализы можно по направлению лечащего врача. Исследование иногда требуется и при геморрагических расстройствах.

Агрегация тромбоцитов: сдать анализ правильно

Готовиться к забору крови следует заранее. Необходимо обсудить с врачом возможность заблаговременной отмены препаратов, особенно аспирина и нестероидных противовоспалительных лекарств. Если это невозможно, лекарства должны быть перечислены в направлении для правильной интерпретации результатов теста.

За 4 часа до сдачи крови нельзя есть, особенно жирную пищу. За 2 часа запрещены кофеиносодержащие напитки. В течение получаса перед анализом нельзя курить и волноваться, следует находиться в покое.

Агрегация тромбоцитов: анализ расшифровывает врач

Референсные значения составляют:

  • с АДФ (5 ммоль/мл): 60—90%;
  • с адреналином: 40—70%;
  • с коллагеном: 50—80%

Отклонения от нормы (отсутствие, снижение разной степени выраженности) позволяют поставить диагноз. При интерпретации результатов исследования учитываются все принимаемые лекарства.

Источник